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Inmunoensayo enzimático indirecto en el diagnóstico de la infección por metapneumovirus en aves de corral Dmitriev, Denis Valerievich

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La infección por neumovirus es una enfermedad respiratoria caracterizada por procesos inflamatorios del tracto respiratorio superior (fosas nasales, tráquea), senos infraorbitarios, acompañada de dificultad para respirar, estornudos, sibilancias, secreción nasal. El neumovirus (APV), o más concretamente el metaneumovirus aviar, es la causa de la enfermedad grave del pavo (rinotraqueitis, TRT) y el "síndrome de la cabeza inflamada" en pollos y pollos. En los EE. UU., Esta enfermedad es relevante solo para la cría de pavos, y allí circulan neumovirus de subtipo C, mientras que en Europa dominan los subtipos A y B, y la enfermedad se registra en pavos, pollos y faisanes. Infección por APV en o hinchazón de la cabeza bilateral. La mortalidad generalmente no supera el 1–2%, y la incidencia es del 10%. La producción de huevos a menudo se reduce en el stock de la manada.

En la Federación Rusa, se ha registrado una infección por neumovirus en los últimos diez años más a menudo en las granjas de carne. Sobre todo en gallinas, aunque no se excluye la detección de anticuerpos específicos contra el virus en aves de razas de huevos.

El diagnóstico se realiza mediante estudios serológicos de sueros pareados de pollos enfermos y sanos en ELISA y mediante métodos biológicos y moleculares para detectar el genoma viral, así como mediante estudios virológicos y bacterianos.

Prevención específica en el extranjero y en algunas granjas de la Federación de Rusia se lleva a cabo vacunas vivas e inactivadas. Vacunación generalizada de pollos de pavo al día. Se observa interferencia entre los virus IBV y APV: el primero inhibe la replicación del segundo en la tráquea. Esto es de fundamental importancia en la preparación de los programas de vacunación. La estrategia de inmunización es similar a la de IBC.

Varias granjas utilizan con éxito la vacuna inactivada doméstica contra esta infección. El tratamiento y la prevención de la enfermedad en aves con síndrome de cabeza inflamada pueden ser eficaces solo con un diagnóstico preciso del agente etiológico que causa este síndrome: una bacteria o un neumovirus, o una combinación de ellos. La infección por neumovirus se ve agravada por un mantenimiento deficiente (ventilación inadecuada, exceso de trabajo, mala ropa de cama, mala alimentación e higiene del agua, mantenimiento de aves de interior de diferentes edades), eliminación y uso de vacunas vivas contra la enfermedad de Newcastle, etc., si se llevan a cabo durante el período de incubación de la infección. El tratamiento con antibióticos es de éxito variable, lo que reduce la gravedad de la enfermedad. El antibiótico debe analizarse para determinar la sensibilidad del patógeno E. coli y ornitobacteria. Se utilizan amoxivilina, cloranfenicol, ampicilina, gentamicina, neomicina y otros. Actualmente, se encuentran disponibles vacunas inactivadas vivas, pero los resultados de su uso no son sencillos (los científicos creen que esto es una consecuencia de los cambios antigénicos en los pollos generalmente complicados por micoplasmas, E. coli, ornitobacterias). Sin subestimar el valor del patógeno como un patógeno respiratorio típico, se debe enfatizar que el neumovirus aviar para pollos no debe considerarse como el factor etiológico primario y más significativo. La infección por neumovirus se encuentra principalmente en granjas de pollos de engorde, principalmente en pollos de parvadas parentales. Los anticuerpos contra el virus se encuentran en muchas granjas, existe una tendencia a aumentar su detección en huevos de aves de corral y, por lo general, sin manifestación clínica.

La etiología viral TRT se estableció en 1985. La enfermedad es complicada por la microflora secundaria y se caracteriza por una alta morbilidad y mortalidad. El mismo virus infecta a los pollos, en los cuales la enfermedad se asocia con el síndrome de la cabeza inflamada de un ave reproductor y se caracteriza por una clínica respiratoria, letargo, un aumento de los senos infraorbitarios y neumovirus unilaterales e interferencia de infecciones que actúan simultáneamente.

Anemia viral de los pollos (síndrome hemorrágico, síndrome de anemia, dermatitis, "ala azul")

Enfermedad viral de pollos jóvenes, caracterizada por hemorragias intracutáneas e intramusculares, lesiones necróticas y atrofia del timo, bursa y tejido linfoide. La enfermedad es causada por un virus de ADN resistente de la familia Circoviridae.

Hay dos formas de infección: vertical, a través del huevo y horizontal, por contacto, a través de la basura y la basura cuando se pica.

Al mismo tiempo, el virus ACV puede integrarse en el genoma del pollo (transmisión vertical) y propagarse por inyección de la vacuna, o directamente en la vacuna.

Instrucciones de carne y huevo de pollos enfermos. Sin embargo, el ave es más susceptible a la infección de la carne, especialmente los pollos de engorde, que probablemente esté relacionado con la intensidad del engorde.

El agente causante de la enfermedad es un virus de la familia Parvoviridae, de forma simple y organizada, con forma de icosaédrico, de 17 a 25 nm de diámetro, que contiene ácido nucleico monocatenario. Lleva a cabo su reproducción en cultivos de células linfoblastoides. Induce la formación en el cuerpo de pollos infectados de anticuerpos neutralizantes, mientras que linfo - neuro - epiteliotrópico.

El virus es resistente al cloroformo, éter, ácido pH-3. A una temperatura de 80 ° C, la inactivación ocurre dentro de los 30 minutos, y a 100 ° C después de 15 minutos. Una solución de formaldehído al 5% inactiva el virus después de 24 horas, el hipoclorito de sodio al 5% y los desinfectantes que contienen yodo a la misma concentración, a 37 ° C durante 2 horas, destruyen completamente el virus.

El pollo es el único propietario afectado por ACV. Los pollos de 2 a 5 semanas de edad son más sensibles a la enfermedad, principalmente pollos de engorde, entre los cuales la incidencia puede ser de 20 a 60%, la tasa de mortalidad es de 5 a 6%.

La fuente del agente causante de la infección son los pollos enfermos y los portadores de virus, que secretan el virus con los excrementos, exudado sanguinolento de las grietas de la piel afectada. La infección se produce de forma horizontal y vertical, la principal ruta de infección es un huevo para incubar infectado. Los factores de transmisión son objetos infectados de cuidado, alimentación y agua.

Recientemente, se ha indicado que las asociaciones de anemia y reovirus de pollos causan un curso más grave de la enfermedad. Se observan fenómenos similares con la asociación de la anemia infecciosa con las enfermedades de Gumboro y Marek. La aparición de los primeros brotes de anemia infecciosa en Japón y Alemania se asocia con la inmunización de aves de corral contra la enfermedad de Marek contaminada con el virus de la anemia infecciosa.

Una vez en el cuerpo, el patógeno infecta las células hematopoyéticas, viola su metabolismo, causando la vacuolización, la formación de inclusiones intranucleares y conglomerados de partículas similares a virus. La eritropoyesis activa se reanuda solo a los 20 días de la enfermedad. En los pollos jóvenes, el virus de la anemia causa anemia progresiva por explosión, atrofia de los órganos linfoides, que se acompaña de un estado de inmunodeficiencia pronunciada. El virus de la anemia de pollos abre la puerta a infecciones virales y bacterianas secundarias y reduce en gran medida la respuesta inmune a la vacunación contra la enfermedad de Marek.

El período de incubación es de 8-14 días. La enfermedad puede ser leve o asintomática, dependiendo del estado del sistema inmunológico.

En los pollos enfermos (dirección del huevo), hay depresión severa, falta de apetito, retraso en el crecimiento, agotamiento. Las membranas mucosas, la piel, el peine y los aretes son pálidos, de color blanco amarillento. A menudo se observa dermatitis gangrenosa. En este caso, las lesiones focales de la piel se localizan en cabeza, alas, pecho, muslo y tibia. De las grietas de la piel a menudo se deriva exudado sangriento-seroso. La dermatitis se complica por la microflora secundaria.

Los pollos de engorde de 10 a 20 días registran: pérdida de apetito, retraso del crecimiento, estado comatoso, alas omitidas, secreción nasal, peine pálido, plumaje húmedo y desaliñado. Algunas personas tienen las piernas y la cabeza hinchadas, la diarrea aparece poco antes de la muerte y se desarrolla una diarrea profusa. La tasa de mortalidad comienza a partir de los 10 días y dura hasta 6 semanas de edad. Los síntomas de anemia registran el 100% de los casos.

La enfermedad se presenta en dos formas: clínica y subclínica. La forma clínica de la enfermedad de los pollos es una consecuencia de la infección primaria de sus madres, que no tienen anticuerpos en la sangre. La manifestación clínica de la enfermedad en los pollos comienza el día 10-14 de su vida y se manifiesta por letargo, membranas mucosas anémicas, diarrea, dermatitis gangrenosa. Los vasos venosos de las alas están abarrotados, con el resultado de que las hemorragias subcutáneas son azules. La piel pierde su elasticidad, se agrieta y, a través de ella, el exudado con sangre se libera a la superficie. La muerte se produce pocos días después del inicio de los signos clínicos. Con los signos clínicos borrados, el desperdicio de pollos varía de 5 a 15%, y en casos agudos hasta 50 a 60%.

En una forma subclínica de la enfermedad, el patógeno se transmite horizontalmente. Los pollos a la edad de 3 semanas y más se ven afectados, debido a la desaparición de sus anticuerpos maternos. Las formas clínicas y subclínicas de la anemia infecciosa de los pollos son inmunosupresoras (suprimen la inmunidad), lo que aumenta significativamente la susceptibilidad a ciertos patógenos.

Cuando se revelan las autopsias, se encuentran los siguientes cambios en los pollitos:

1. Agotamiento severo.

2. Dermatitis séptica, necrótica, dermatitis gangrenosa en las alas.

3. Hemorragias en los músculos esqueléticos y la membrana mucosa del estómago glandular

4. Edema seroso del tejido subcutáneo en la cabeza y las piernas, en los extremos de las alas.

5. Focos de necrosis en el bazo.

6. Atrofia de Bursa de Fabrizia y Timo.

7. Anemia e hiperplasia renal.

8. Atrofia de la médula ósea.

9. Distrofia hepática con necrosis verdosa.

10. Hemorragias intramusculares y subcutáneas.

11. La acumulación de exudado azul oscuro debajo de la piel, especialmente en los extremos de las alas: el "ala azul".

El diagnóstico de la anemia viral de los pollos se realiza sobre la base de datos epidemiológicos, signos clínicos, cambios patológicos y resultados de laboratorio. Uso del método de diagnóstico serológico basado en el método de inmunofluorescencia indirecta (NIF), así como un método altamente específico para la determinación en la sangre de aves de anticuerpos contra VAC mediante el método de inmunoensayo (prueba de Elisa). Es posible diagnosticar la enfermedad sobre la base de un estudio de la sangre de pollos enfermos en 12 ... 16 días después de la aparición de la enfermedad, mientras que el hematocrito se reduce a 11 ... 20% a una tasa de 30 ... 40%. Este es un método simple pero específico para el diagnóstico de laboratorio de la anemia de pollo, ya que otros agentes virales no causan tales cambios en la sangre.

Tratamiento Actualmente en Alemania, la vacuna con licencia llamada "Timovak", que se bebe a un ave una vez a las 13-18 semanas de edad.

Inmunidad y prevención específica.

Para crear una defensa inmune de las medias jóvenes, el mejor método es inducir inmunidad transovárica congénita resistente en la descendencia mediante la vacunación de los reproductores de pedigrí. Alemania ya ha desarrollado una vacuna con el nombre comercial "Timovac", que se ha probado en muchos países europeos. Se muestra su seguridad y eficacia. La inmunidad transovárica protege a los pollos de la enfermedad durante las primeras 3 semanas de vida.

Medidas de prevención y control.

Las medidas preventivas deben ser integrales, para evitar que el patógeno sea llevado a la granja avícola. Actualmente, el sacrificio de aves seropositivas se considera una medida radical para controlar y prevenir la enfermedad. El plumón y las plumas obtenidas durante el sacrificio de aves en casetas avícolas disfuncionales se desinfectan a una temperatura de 85 a 90 ° C durante 30 minutos. Basura y cama profunda desinfectar biotérmicamente. Las medidas a tomar deben garantizar la reducción del foco epizoótico, lo que evitará la propagación del patógeno más allá de sus límites.

El daño económico durante un brote de una enfermedad se expresa en una mortalidad de 10 a 60% y puede ser la causa de una vacunación infructuosa contra otras infecciones. También grandes costos son las granjas avícolas en la eliminación de la enfermedad.

Características de la familia del género M arpeitouksh Ragatuhoutske

Los neumovirus aviares contienen ARN, con un genoma negativo monocatenario no segmentado perteneciente a la familia Paramyxoviridae de la subfamilia Pneumovirinae del género Metapneumovirus (Pringle, 1998, Lamb et al., 2000). El genoma de ARN consta de ocho genes con sus productos organizados en el siguiente orden: 3 -NPMF-M2-SH-GL-5, con una longitud total de 13134 (AMPV subtipo C) a 13378 (HMPV) nucleótidos (Ishiguro et al., 2004, Lwamba et al., 2005).

El virus tiene una estructura compleja y está cubierto con una membrana de lipoproteínas, que se forma cuando el virión se va. Principalmente forma partículas esféricas, simétricas en forma de espiral, que tienen dimensiones de 80-200 nm. También pueden aparecer viriones pleomórficos con un diámetro de 150-200 nm y una longitud de 1000-10000 nm. El nucleótido helicoidal tiene una longitud de 14 nm.

La cáscara se asemeja a una franja con protuberancias superficiales de 13 a 15 nm de largo, que representan 2 a 3 nm de ancho en la base, con un máximo de 3 a 5 nm, espaciados entre picos de 2 a 3 nm, que incluyen hemaglutinina y neuraminidasa (HN) o hemaglutinina (H). o glicoproteína (G) de superficie y fusiones (glicoproteína F), cubriéndola uniformemente. No hay actividad de hemaglutinación en relación con los eritrocitos de pollos, patos, cerdos, ganado y CBHHOK marino (Giraud et al., 1986, Baxter-Jones et al., 1987, Collins a. Gough, 1988, Buys et al., 1989, O Loan et al, 1992).

La masa molecular del genoma es del 0,5% en peso del virión y varía en el género Pneumovirus en 17-20 metros cuadrados. El genoma suele ser monomérico o, a veces, multiploide, no segmentado y contiene una única molécula de ARN monocatenaria lineal, con polaridad negativa, la secuencia GAA interna sigue la traducción de la señal de inicio al comienzo del siguiente gen. Los viriones también pueden contener una copia polar positiva de una sola hebra del genoma. La secuencia completa del genoma de ARN es 15200-15900 nucleótidos.

Los neumovirus de las aves no contienen genes NS no estructurales, que acortan su genoma en 13.3 kv, y sus ocho genes van en el orden de Z-NPM-F-M2-SH-GL-5 - características características del metapneumovirus de aves y humanos (Ling, Easton, Pringle, 1992, Yu et al., 1992, Lamb et al. 2000). Todos los genes contienen un marco de lectura abierto, con la excepción de M2, que tiene dos marcos de lectura superpuestos que codifican 2 proteínas: M2-1 (184-186 aminoácidos) y M2-2 (71-73 aminoácidos) (Yu et al., 1992) .

Debido a la diferente organización de los genes y al bajo nivel (40%) de la identidad de la secuencia en comparación con el neumovirus de los mamíferos, APV se asignó al nuevo género Metapneumovirus en la subfamilia Pneumovirinae (Pringle, 1999).

Las proteínas constituyen aproximadamente el 75-80% en peso de la partícula. El genoma viral codifica entidades estructurales y no estructurales. Los viriones contienen 7 proteínas estructurales que se encuentran en la nucleocápside, la envoltura, la membrana y la matriz. La envoltura viral incluye dos proteínas de membrana incrustadas. La estructura interna del neumovirus se muestra en la fig. 1.

La proteína de superficie F realiza funciones de unión, esta es una proteína de fusión. Durante el proceso postraduccional, se sintetiza dentro de la célula infectada cortando la proteína, el precursor para crear las subunidades F1 y F2 relacionadas con el disulfuro del virión (aMHH0-Fl-S-S-F2-Kap60Kcmi). Es responsable de la combinación con la función celular y hemolítica (Kapczynski, Sellers, 2003), aunque los neumovirus, a diferencia de otros paramixovirus, no poseen actividad hemaglutinante y neuraminidasa (Collins et al, 1996).

La división de la proteína F en proteínas grandes F1 y F2 pequeñas media en la fusión celular y es necesaria para la propagación del virus (Collins et al., 1996). Se asume que la parte amino terminal de F1 está involucrada en la fusión de membrana y está altamente conservada entre los tres tipos A, B y C del neumovirus de las aves (Naylor et al., 1998, Seal, 2000, Seal et al., 2000).

La estructura organizativa del genoma del neumovirus del ganso (aislado de ganso 15a / 01) es similar a la de las cepas de AMPV / C de pavos. Sin embargo, el virus tenía un gen G grande, el más grande entre los neumovirus y los metaneumovirus (Bennett et al. 2004). El tamaño de la proteína G 15a / 01 (585 aminoácidos) era más del doble del tamaño de la proteína G de otros virus del subtipo C y del metapneumovirus humano, y más de 170 aminoácidos más grande que el tamaño de las proteínas G de los otros subtipos de AMPV.

Los subtipos A, B, D AMPV que circulan en Europa tienen tamaños comparables de proteínas G (319, 414 y 389 aminoácidos, respectivamente) y causan una gravedad comparable de la enfermedad, incluidos los cambios patológicos en los cilios de la mucosa de la concha nasal y el desarrollo de síndrome de cabeza hinchada en pollos ( Pattison, Chettle, 1989, Gough, 1994, Maharaj, 1994, Shin et al., 2000). Esta relación se confirmó mediante el análisis de secuencia del gen de la proteína F (Naylor et al., 1998) y el gen M más conservador (Randhawa et al., 1996). Aunque diferentes aislamientos de APV fueron antigénicamente similares, podrían ser divididos serológicamente en dos grupos separados (Cook et al, 1993, Collins et al., 1993). Эта разница в вирусных белках объясняется различиями, обнаруживаемыми при использовании для серологических исследований разных антигенов (Senne et al., 1997).

Диагностика метапневмовирусной инфекции птиц

Диагноз на МПВИ птиц устанавливают на основании лабораторных исследований с учетом эпизоотологических данных, клинических признаков и патолого-анатомических изменений.

Los signos clínicos de MPVI en pavos y pollos no son patognomónicos y, por lo tanto, es necesario utilizar los métodos de diagnóstico precoz y retrospectivo (IABorisova, 2008). La confirmación de la enfermedad depende de la evidencia de la presencia del virus en el material clínico, los anticuerpos específicos del virus en el suero del paciente y las aves enfermas. Como regla general, el aislamiento del virus fue mucho más difícil para los pollos que para los pavos y la razón de esto no está clara (Weisman et al., 1988, Jones, 1996, Catelli et al., 1998). Aunque hay un mensaje de Taiwán (Lu et al., 1994) sobre el aislamiento del virus en pollos con síndrome de cabeza inflamada.

Para el aislamiento primario del virus del material de campo de pavos y pollos, los embriones en desarrollo se inocularon en el saco vitelino (Giraud et al., 1988, Buys et al., 1989a, Panigrahy et al., 2000), o traqueal cultivos de órganos (TOK) de embriones de pollos y pavos (McDougall & Cook, 1986, Wilding et al., 1986, Wyeth et al., 1986, Giraud et al., 1988). Después de 2 o 3 pasajes, los autores notaron lesiones de los embriones. El líquido embrionario se inoculó en cultivos celulares: células Vero (Buys et al., 1989a, Williams et al., 1991) o fibroblastos de embrión de pollo (Panigrahy et al., 2000). Los investigadores (Goyal et al., 2000) identificaron el subtipo C de MPV inicialmente en el cultivo de FEC, seguido de la adaptación del aislado viral en las células Vero.

El sistema elegido para el aislamiento de MPV es el cultivo de órganos traqueales (McDougall & Cook, 1986), que generalmente se prepara a partir de embriones SPF de pollo, aunque los embriones de pavo también son adecuados y tienen la misma sensibilidad (Naylor y Jones, 1994). El método puede llevar mucho tiempo. Las muestras frescas (tejidos o tampones (frotis)) del tracto respiratorio superior pasan hasta tres veces, durante el examen de cada pasaje para ciliostasis hasta 11 días. Puede haber dificultades para aislar el virus 6 a 7 días después de la infección, ya que el material que contiene el virus puede estar contaminado y el patógeno puede identificarse definitivamente por algunos otros métodos, como la neutralización viral o la tinción inmunofluorescente.

Cuando se usó CET, el material se sometió a 4 pasajes "ciegos" con un intervalo de 3 a 4 días, examinándolos para determinar la actividad ciliar durante 10 días (Cook et al., 2001).

Para la infección experimental, se puede usar tinción inmunofluorescente directa o indirecta en pasajes traqueales o nasales, pero esta técnica no es adecuada para material de campo. Williams et al. (1991) encontraron una buena correlación con el aislamiento del virus y la histopatología, y aunque la inmunofluorescencia (IF) es más rápida que la secreción, su valor en infecciones de campo todavía no se ha evaluado, y también es posible que su uso se limite a un período de menos de una semana después de la infección.

Jones et al. (1988) encontraron que la IF es un método más sensible que aislar el virus de los pavos y proporciona resultados más rápidos (Majo et al., 1995, Jones, 1996). Catelli et al., 1998 compararon el aislamiento del virus con la tinción con inmunoperoxidasa (PI) para la detección de MPV en pollos infectados con SPF y establecieron su superioridad.

Los anticuerpos séricos contra Ml IB aviar pueden detectarse mediante inmunofluorescencia indirecta, neutralización viral y ELISA (Baxter-Jones et al., 1986, 1989). La inmunofluorescencia indirecta se utilizó con suero de convalecientes antes de que el virus pudiera aislarse en el TSC. Esta técnica fue muy útil como prueba de detección inicial (Baxter-Jones et al., 1986). La neutralización viral requiere mucho tiempo y es una prueba que requiere mucho tiempo. Se utilizó para comparar cepas en una reacción cruzada de neutralización (Baxter-Jones et al., 1987) o para estudiar los sueros de varias especies de aves para las que no había antiglobulinas. En la serología de rutina, tales pruebas han sido suplantadas por ELISA (Grant et al., 1987, Chettle & Wyeth, 1988, Gerrard et al., 1990).

Evaluación de la sensibilidad y especificidad del sistema de prueba desarrollado.

En la última década en la Federación Rusa, el número de casos de infección por metapneumovirus en aves ha aumentado.

Características biológicas del patógeno (capacidad de persistir y circular entre las aves sinantrópicas y migratorias), la presencia de 4 subtipos de virus (A, B, C, D), el uso de material de reproducción sin tener en cuenta la situación epizoótica en esta economía (dotación) , alta concentración de aves (a menudo de diferentes edades en un sitio), imperfectas y / o no conformes con la tecnología de cultivo (despoblación, microclima, desinfección, ventilación, densidad de siembra, alimentación). El curso del proceso infeccioso causado por el MPV de las aves se complica por la presencia de varios patógenos virales y bacterianos en las granjas. En este sentido, el MPVI de aves en granjas avícolas es tanto mono - (subclínico) como asociado (complicado) de infección.

Al probar el sistema de prueba desarrollado (registro de un virus de anticuerpos específicos en el suero de las aves), también estudiamos la situación de la epizootia en granjas avícolas de varias direcciones (11113, industrial), utilizando métodos de investigación virológicos (aislamiento e identificación del virus) y bacteriológicos.

En cada granja, se analizó una situación epizoótica, se identificaron las condiciones que contribuyeron a la propagación y reproducción del patógeno, se determinaron las fuentes de infección y se evaluaron las condiciones de alojamiento, alimentación de las aves y siembra.

El hato parental de las fincas encuestadas se completa con huevos para incubar jóvenes y / o reproductores, en los que se registró previamente una infección por metapneumovirus y actualmente se está realizando la vacunación preventiva de aves de corral con vacunas vivas e inactivadas de varias empresas (productores).

Dirección del huevo de CJSC "Nevskaya Poultry Farm" (industrial), completado con stock diario de Finlandia. Sobre la base de un examen clínico de un hato adulto, se estableció una condición satisfactoria para las gallinas ponedoras, la cubierta de plumas es suave, brillante, las vieiras y los aretes son de color rojo brillante, el ave está activa, la producción de huevos es del 90-95%. En algunos individuos, se observaron trastornos respiratorios (inhalación con pico abierto y cuello alargado, sibilancias), hinchazón de los senos infraorbitarios y espacio submandibular.

En la autopsia de un ave caída de varias edades, se registraron los siguientes cambios anatomopatológicos: - en pollos de hasta 10-15 días de edad - yema no absorbida, neumonía, enteritis, - en gallinas ponedoras caídas 122-372 días - sinusitis infraorbitaria, rinitis, traqueítis hemorrágica, Pericarditis fibrinosa, enteritis.

Entre los pollos de 1 a 15 días de edad, se observa un aumento de la jubilación con síntomas respiratorios en el taller de reproducción.

Examen bacteriológico de cultivos de Escherichia coli (senos infraorbitarios, pulmones) con propiedades adhesivas pronunciadas y Salmonella spp. (corazón, hígado), lo que indica una alta infección de aves con Escherichia coli patógena y Salmonella spp. y mal estado sanitario.

Durante el estudio virológico, se aisló metapneumovirus de aves a partir de patmateriales (cabezas afectadas, tráquea y pulmones) de aves caídas en células Vero y fibroblastos de embrión de pollo.

Las muestras de sueros sanguíneos de aves de diferentes edades (150-446 días) se examinaron para determinar la presencia de anticuerpos específicos contra el metaneumovirus mediante ELISA utilizando el sistema de prueba de diagnóstico desarrollado. Los resultados de la investigación se presentan en la Fig. 5. Los resultados de las pruebas serológicas de muestras de suero sanguíneo de pollos de una parvada industrial de la p / f “Nevskaya” de la región de Leningrado mostraron altos títulos de anticuerpos contra el MPV de las aves, y envejecieron de 150 a 446 días. fueron de 5699 ± 822 a 11259 ± 948 con un 100% de detección, lo que indica la circulación del virus en el rebaño.

La dirección de la carne de la granja avícola "Tula Broiler" se completa con el material de reproducción importado. Un examen clínico de pollos de engorde, animales jóvenes y padres mostró condiciones satisfactorias. Sin embargo, se observó sinusitis infraorbitaria, hinchazón del espacio maxilar (cabeza hinchada) en individuos de aves de diferentes grupos de edad (1,5-2%). La autopsia patológica reveló sinusitis, conjuntivitis, traqueítis y neumonía.

Para los estudios de laboratorio, se entregaron las cabezas afectadas y los cadáveres de aves de diferentes edades.

El examen bacteriológico de los hinchados, cabezas, pulmones de pollos se aisló, 12 cultivos de Escherichia coli, 5 cultivos de Staphylococcus aureus y epidermidis, y 2 cultivos de Proteus vulgaris.

Cuando examen micoplasmatológico de raspados. de la membrana mucosa de la tráquea: se aisló un cultivo de M..gallisepticum y se detectaron anticuerpos serológicos contra el patógeno en títulos positivos del 20 al 60% de las muestras estudiadas, H

Para realizar estudios virológicos, se tomaron hisopos y raspados de los senos infraorbitales, el paladar y el trachesh moco, luego se prepararon suspensiones en solución de Hanks con antibióticos. El material resultante se infectó con un cultivo de células Vero y un cultivo de células embrionarias de pollo. Con pasajes sucesivos, se observó un efecto citopático intensificador en la monocapa de cultivo, que se expresó redondeando los kyets en áreas limitadas de la monocapa, causando granularidad citoplásmica en ellos, 3-4 días después de la infección. La degeneración celular al 70–80% se observó durante 6–7 días, entonces. en algunas zonas, la formación de sincitios se observó como un signo característico del JRS para el metapneumovirus de las aves.

Monitoreo serológico para la infección por metapneumovirus de aves en granjas avícolas en varias regiones de la Federación Rusa

El análisis de los datos de la literatura sobre la optimización de las condiciones para obtener un inmunoabsorbente activo en fase sólida para ELISA mostró la importancia de la naturaleza del polímero utilizado como fase sólida (D.V. Maslov, 2006). Se sabe que el poliestireno se caracteriza por una mayor capacidad de absorción en comparación con otros portadores (Herrman, Collins, 1976). Sin embargo, las placas de poliestireno extranjeras y domésticas que se producen actualmente difieren significativamente unas de otras en sus características de sorción. Los datos de la literatura (GV Rezapkin et al., 1986) y los resultados de nuestra propia investigación han demostrado que las tabletas domésticas (Lenmedpolymer, St. Petersburg) tienen una baja actividad de sorción en comparación con las extrañas. Por lo tanto, para obtener un inmunoabsorbente activo en fase sólida en nuestro trabajo utilizamos tabletas de empresas extranjeras.

La dilución de trabajo del antígeno se determinó mediante el método de titulación "escalonada" en la superficie de los pocillos de las placas de poliestireno en solución salina tamponada con fosfato, pH = 7,3-7,5, durante 16-18 horas a 4 ° C con dilución de los sueros de control 1: 400. La dosis de sensibilización óptima del antígeno metapneumovirus fue una concentración de 6-8 µg por pocillo. La dilución de trabajo óptima del conjugado comercial liofilizado se seleccionó experimentalmente. En nuestros experimentos, la dilución de trabajo del conjugado fue 1: 300-1: 400. Se utilizó ortofenilendiamina ("Sigma") como sustrato a una concentración de 5 mg por 12 cm de tampón fosfato-citrato, pH = 4.9-5.0.

Durante la formulación de la reacción, los sueros de prueba y de control, el conjugado se incubó en un termostato a 37 ° C durante 30 minutos, ya que según la literatura se sabe que el establecimiento de una constante de equilibrio entre el antígeno inmovilizado en la superficie de poliestireno y anticuerpos y en una etapa posterior entre el complejo inmune resultante (antígeno) anticuerpo) y el conjugado se produce casi 30 minutos a 37 ° C (EH Gorbachev et al., 1988, DV Maslov, 2006).

Para eliminar interacciones no específicas durante ELISA, se utilizan sistemas de tampón de lavado que incluyen detergente no iónico (tween-20) y proteínas inmunológicamente inertes hasta el 1-2% o, junto con el detergente, una alta concentración de iones caotrópicos C1 (VN Verbov, 1988, EH Gorbachev et al., 1988, DV Maslov, 2006). Utilizamos tampón de fosfato de potasio 0,01 M pH = 7,2-7,4, que contenía NaCl 0,5 M con una concentración final de 0,1% del detergente tween-20, lo que aseguró la especificidad del inmunoensayo enzimático. Por lo tanto, los estudios realizados permitieron optimizar las condiciones para la formulación de la reacción al detectar anticuerpos específicos contra el metaneumovirus de las aves.

El título de diagnóstico en ELISA se estableció mediante el método de "titulación de ajedrez" de varios sueros, comenzando con una dilución de 1: 100, a una concentración estándar (6 μg por pocillo) de antígeno absorbido. El análisis de los resultados mostró que la dilución de suero 1: 400 permite no perder el suero débilmente positivo. Al mismo tiempo, 20 sueros sanguíneos de granjas que eran seguros para la infección por metapneumovirus de aves resultaron negativos en ELISA, lo que confirma la especificidad del sistema de prueba de diagnóstico desarrollado. En este sentido, al examinar las granjas avícolas en busca de infección por metapneumovirus, creemos que es recomendable comenzar la formulación ELISA con una dilución de suero de 1: 100 y considerar la dilución de suero de un título de diagnóstico de 1: 400 para la infección de metapneumovirus en aves.

Para la determinación cuantitativa de anticuerpos contra el metaneumovirus de las aves en el estudio de sueros sanguíneos, ofrecemos un método de diluciones en serie y un método de dilución simple.

Para determinar el título final de los sueros analizados en una sola dilución, se utilizó el método de análisis de regresión en el programa de computadora Microsoft Excel. Se realizaron cálculos matemáticos para diluciones de suero de 1: 200, 1: 400 y 1: 800. Los coeficientes de regresión lineal se encontraron para los valores de lg S / P y lg T (Tabla 3 y Fig. 4). Se estableció que el valor más alto del coeficiente de correlación se determinó para una dilución de suero de 1: 400, que se tomó como la de trabajo.

La ecuación de regresión lineal (lg T = 1.38 lg (S / P) + 3.54) para una dilución de suero de 1: 400 se utilizó para calcular el valor numérico del título. Cabe señalar que la ecuación de regresión lineal obtenida será confiable para ciertos valores de la densidad óptica de los sueros de control positivos y negativos. Se encontró que el rango de parámetros ópticos (OD) del control negativo era de 0.088 a 0.160. Los valores válidos de los indicadores OP de control positivo fueron de 0.504 a 0.751.

Para distinguir entre reacciones no específicas, cuestionables y específicas, se determinaron los valores de umbral de la relación S / P. El indicador S / P, que correspondía al límite inferior del intervalo de confianza del 95% de la muestra estudiada de valores OD, se tomó como el valor umbral para la reacción negativa. La puntuación S / P para la reacción negativa fue de 0,2. El valor de umbral correspondiente a la reacción positiva mínima esperada se consideró el valor S / P establecido para el límite superior del intervalo de confianza del 95%. El valor de S / P para una reacción positiva fue de 0.24. Los valores intermedios 0.21-0.23 correspondieron a la zona de resultados "dudosos".

Patogenia del metaneumovirus

La transmisión horizontal del virus se realiza por contacto directo o indirecto con las secreciones nasales y respiratorias de un ave enferma. En las granjas avícolas y en el hogar, se observa un alto nivel de seroprevaluación en las aves de corral productivas.

Sin embargo, se debe tener en cuenta que la presencia de títulos elevados de anticuerpos en las aves no siempre se acompaña de síntomas clínicos. En las aves, el metapneumovirus se replica en el tracto respiratorio superior de un ave de cualquier edad. El virus también puede afectar los órganos reproductivos del ave.

La replicación de la MPO se produce en las células del epitelio ciliado de las fosas nasales y la tráquea, causando deformación y pérdida de los cilios de la membrana mucosa. Esto contribuye a la penetración activa de la microflora patógena secundaria, lo que complica y empeora el curso del proceso patológico.

24 horas después de la infección, el virus puede detectarse en la cavidad nasal y la tráquea del ave. La cantidad máxima de virus se acumula 3-6 días después de la infección.

Muchos científicos en sus estudios han demostrado la existencia de protección cruzada de cepas de vacuna de infección experimental de los subtipos A y B de metaneumovirus. Se demostró que la influencia del subtipo B de metaneumovirus previno el desarrollo de síntomas después de la infección experimental con el subtipo A de virus.

Se puede suponer que la inmunización con cepas del subtipo B es más efectiva que las del subtipo A. Además, los estudios de campo en diferentes países indican que el metapneumovirus de campo en aves del subtipo causa signos clínicos graves y es más difícil controlar e implementar programas de vacunación.

El período de incubación en pavos, gallinas ponedoras y parvadas parentales depende de varios factores: presión infecciosa del patógeno de campo, problemas de manejo y seguridad biológica, estrés, problemas de salud y similares.

Las cosas peores están con los factores anteriores, cuanto antes se puede observar el desarrollo de las manifestaciones clínicas de la enfermedad asociada con el metaneumovirus.

La infección por metapneumovirus es la causa del desarrollo del síndrome de cabeza hinchada en los pollos. Este síndrome se caracteriza por el desarrollo de síntomas respiratorios, apatía, hinchazón de la cabeza, senos subglaciales y edema periorbital unilateral o bilateral.

Эти симптомы часто сопровождаются церебральной дезориентацией, кривошеей, опистотонусом. Хотя смертность птицы обычно не превышает 1-2%, заболеваемость может достигать и 10%, а также негативно влияет на репродуктивные показатели птицы.

Клинические признаки метапневмовирусной болезни

En los pollos de engorde, los signos clínicos se caracterizan por manifestaciones respiratorias a la edad de 20-35 días y generalmente se limitan al tracto respiratorio superior (tráquea, senos nasales). Los síntomas más característicos de esta enfermedad son: estornudos, tos, secreción nasal, conjuntivitis e hinchazón de los senos.

La infección causada por la MPO contribuye al desarrollo y la manifestación clínica de infecciones respiratorias secundarias en pollos y pavos, lo cual se ha demostrado utilizando una serie de patógenos respiratorios. Por lo tanto, el cuadro clínico clásico puede complicarse con infecciones bacterianas secundarias, generalmente E. coli, O. rhinotracheale, etc.

La interrupción del sistema nervioso en pollos de engorde después de la infección con MPO es difícil de detectar en un período corto de la vida de las aves.

Las infecciones secundarias y las condiciones inadecuadas de alojamiento de las aves de corral son los factores determinantes de la gravedad de los signos clínicos. Especialmente bien visto en pollos de engorde. El estrés es un desencadenante en el desarrollo de la mayoría de los signos clínicos de la enfermedad, independientemente del tipo de producción de aves de corral. Entre estos factores de estrés, estos son la productividad máxima en gallinas ponedoras y parvadas parentales, alta densidad de siembra.

En los rebaños y las capas de los padres, los signos clínicos de daño al sistema respiratorio durante la infección por metapneumovirus son muy similares a los de los pavos. Las manifestaciones clásicas del efecto de la MPO en el sistema reproductivo de los pollos son una disminución en la producción de huevos y un deterioro en la calidad de la cáscara del huevo. También pueden aparecer síntomas nerviosos, como la tortícolis y el opistotono.

En los rebaños parentales no vacunados de pollos de engorde, además de los signos clínicos anteriores, también se puede desarrollar osteomielitis craneal. Esto se debe a la propagación de una infección bacteriana secundaria del oído medio. Típicamente, el desarrollo de signos clínicos en capas y en parvadas progenitoras está estrechamente relacionado con el inicio de un período productivo de la vida.

Es por eso que es mucho menos posible revelar un cuadro clínico pronunciado de una infección por metapneumovirus durante el período de reproducción de aves de corral. Por otro lado, establecer si el contacto del ave con la OIG fue bastante simple mediante el uso de ELISA.

Diagnósticos

El diagnóstico se basa en datos clínicos, no es confiable, solo se puede tener en cuenta como una guía para el diagnóstico diferencial. Este último debe contener la diferenciación de una gran cantidad de enfermedades respiratorias (micoplasmosis, ornitobacteriosis, bronquitis infecciosa, influenza aviar de baja patogenicidad (LPAI)).

El diagnóstico final debe realizarse interpretando los resultados de las pruebas de laboratorio: diagnósticos serológicos y moleculares. Cabe señalar que el diagnóstico molecular tiene sus limitaciones. Esto se debe al corto período de localización del virus en los tejidos.

La mejor opción es el uso simultáneo de varios métodos para diagnosticar la enfermedad. Dependiendo de los objetivos y las posibilidades de la investigación de laboratorio, el diagnóstico de la infección por metapneumovirus en pollos de engorde puede llevarse a cabo utilizando los siguientes algoritmos:

Si es posible, use solo el método ELISA.

  • Si las manifestaciones clínicas son agudas y ocurren en la semana 2-3 de vida, la selección de sueros sanguíneos se realiza en los primeros signos clínicos y 2-3 semanas después de eso. También es necesario diferenciar la enfermedad de Newcastle, bronquitis infecciosa,
  • cuando se observan problemas respiratorios moderados durante el período de engorde y para una disminución en el rendimiento de la producción al final del engorde, se recomienda tomar muestras de las aves para el sacrificio.

Debe evitarse el muestreo para ELISA hasta los 14 días de edad, ya que existe la posibilidad de detectar anticuerpos maternos. La excepción es cuando el propósito del muestreo es evaluar los anticuerpos maternos, entonces es conveniente tomar muestras de un ave a la edad de 2-3 días.

Aplicar ELISA y Diagnóstico Molecular (PCR)

  • en las primeras manifestaciones clínicas, se deben tomar muestras (frotis de los senos nasales, tráquea, senos periorbitarios) para estudios de PCR,
  • No tomar muestras de aves con manifestaciones clínicas graves. Se recomienda seleccionar material para la investigación de aquellos individuos de un hato infectado, en los que se detectaron síntomas clínicos en la etapa inicial,
  • para un ELISA, las muestras de suero de aves de corral se deben recolectar de este mismo rebaño a la edad del sacrificio.

Enfermedades virales reales de las aves asociadas a lesiones del tracto respiratorio, diagnóstico y prevención.

La creación de empresas avícolas a gran escala equipadas con equipos modernos, permite que en un área limitada crezcan al mismo tiempo hasta un millón o más de aves. La mayoría de las empresas avícolas reducen los descansos sanitarios, vuelven a empacar el ganado, lo que provoca la "fatiga" de los locales y la acumulación de microflora viral y bacteriana patógena en el medio ambiente. La tecnología “todo está vacío, todo está tomado” se usa muy poco. Las fallas en la tecnología de cultivo, la violación de las normas sanitarias y veterinarias, la mala calidad de la alimentación, el estrés de origen diferente, tienen un efecto negativo en la resistencia del cuerpo del ave, conducen a un debilitamiento del sistema inmunológico y, como consecuencia, la aparición de enfermedades infecciosas de diversas etiologías. La práctica de cambios frecuentes en los esquemas de vacunación, el espectro de productos biológicos, la introducción injustificada de nuevas vacunaciones en el esquema y el uso de vacunas vivas fabricadas sobre la base de cepas "calientes" y variantes, así como el uso de vacunas de múltiples etapas, conduce a la expansión del espectro de microorganismos que circulan en la economía. La vacunación de un ave débil, un ave que se encuentra en un estado inmunosupresor, infectado con cualquier patógeno, provoca un aumento en la virulencia de los virus de campo y causa un curso subclínico de infecciones en el contexto de la vacuna. El curso de las enfermedades infecciosas en las formas subclínicas, latentes y asociadas dificulta el diagnóstico, la prevención y la eliminación de enfermedades. De particular interés son las enfermedades infecciosas asociadas con lesiones del tracto respiratorio, en las cuales la transmisión por aire conduce a la rápida propagación de la infección a un número significativo de aves de corral, independientemente del sistema de alojamiento. De las nuevas enfermedades para nuestro país, este grupo debe incluir la infección por metapneumovirus (MPVI), la bronquitis infecciosa de los pollos (IBC) causada por cepas variantes del virus IBC. La enfermedad de Newcastle (NB), la laringotraqueítis infecciosa (ILT) y, por supuesto, la influenza aviar (EE) no pierden relevancia. El diagnóstico de ILT, NB, GP no es difícil, en contraste con el diagnóstico de MPVI e IB. Esto se debe a la diversidad de cepas de virus, a las características de los patógenos y al hecho de que estas infecciones a menudo ocurren en forma asociada con otras infecciones virales y su curso siempre se complica por la aparición de infecciones bacterianas secundarias (secundarias), como colibacteriosis, micoplasmosis respiratoria, ornitobacteriosis. Hacen difícil evaluar el cuadro clínico y los signos anatomopatológicos de la micotoxicosis (daño al hígado, riñones), el uso generalizado de antibióticos (sin inflamación de los senos y la cabeza), el curso de las enfermedades en el fondo de la vacuna y en asociación. Debido al hecho de que las enfermedades mencionadas tienen una serie de síntomas similares, no es suficiente realizar solo un estudio clínico y patológico-anatómico al hacer un diagnóstico. Por ejemplo, los signos clínicos comunes para estas enfermedades son rinitis, conjuntivitis, hinchazón de los senos infraorbitales o cabeza, para NB, HF y MPVI: signos nerviosos. Entre los signos patoanatómicos, traqueítis, neumonía o edema pulmonar, peritonitis yema, signos de complicación con microflora secundaria son similares. Por lo tanto, el diagnóstico siempre debe ser exhaustivo. Además de la investigación clínica y de autopsia, es necesario realizar pruebas diagnósticas de laboratorio, incluidos los estudios serológicos y virológicos. La reacción en cadena de la polimerasa (PCR) se puede usar para escribir el patógeno. Sin embargo, debe recordarse que solo la selección del patógeno es la base para realizar el diagnóstico final. Para la investigación de laboratorio, es importante seleccionar correctamente el material de la patente. El resultado del estudio y su informatividad dependen del momento del muestreo, la edad del ave al momento del muestreo, el cumplimiento del material de la patente (órganos, tejidos que contienen el patógeno) con el diagnóstico previsto, el método de conservación y las condiciones para su entrega al laboratorio. Por lo tanto, las muestras de suero para los estudios de monitoreo deben seleccionarse en dinámica de una sola manada. El resultado más confiable se puede obtener en el estudio de sueros pareados. Cuando ocurre una enfermedad, se toman muestras de sangre en el momento de la primera manifestación de signos clínicos o patológicos y después de 14-21 días, y si es necesario (por ejemplo, cuando el virus NB circula en un ave adulta) cada 14 días durante 1,5-2 meses. El documento adjunto debe indicar el momento de la vacunación y el nombre de los productos biológicos utilizados en la granja avícola. Al realizar estudios para ajustar el calendario de vacunación, especialmente para pollos de engorde, se deben tomar muestras de sangre a intervalos de 3 a 5 días, de 1 a 3 días a 38 a 40 días, a fin de seguir la dinámica de reducir el nivel de anticuerpos maternos, la formación después de la vacunación. La inmunidad y el momento de un posible golpe en una manada de virus de campo. Al desarrollar esquemas para la prevención de estas enfermedades, es necesario tener en cuenta la situación epizoótica en la granja, la situación epizoótica en las granjas que suministran productos de pedigrí, signos clínicos y patológicos, los resultados de los estudios diagnósticos (serológicos, virológicos). Junto con el ajuste del esquema de vacunación en el caso de una enfermedad infecciosa, es necesario identificar y eliminar las deficiencias en las medidas sanitarias y veterinarias, en la producción de aves de corral y en la tecnología de alimentación, en el trabajo de los asistentes, ya que solo llevar a cabo medidas antiepizicóticas en el complejo permitirá eliminar el brote de la enfermedad y garantizar una mayor epizootia Bienestar de la avicultura. Al desarrollar esquemas para la profilaxis de vacunas contra infecciones respiratorias, la creación de inmunidad local (en tejidos) en aves, el respeto por la prioridad, durante las vacunaciones, los intervalos entre vacunaciones, la selección de métodos de vacunación, así como la compatibilidad de los productos biológicos con su introducción simultánea son de particular importancia. La bronquitis infecciosa de los pollitos es una enfermedad altamente contagiosa caracterizada por lesiones del tracto respiratorio, así como el sistema genitourinario de las aves. El agente causante de IBV es un virus que contiene ARN que pertenece a la familia Coronaviridae. Actualmente, más de 100 variantes de virus del campo han sido aisladas y serotipadas. Los pollos de todas las edades están enfermos, pero los pollos son más susceptibles antes de los 30 días. Formas de infección - aerogénica, de contacto, transovárica. Los signos clínicos en pollos de 1 a 30 días de edad se manifiestan como letargo, somnolencia, deterioro del apetito, rinitis, sinusitis, conjuntivitis, secreción nasal y ocular, y sibilancias. Los pollos sacuden la cabeza, tienen dificultad para respirar con el pico abierto. La mortalidad puede ser de hasta 10-35%. En los pollos adultos, se observan signos respiratorios leves, una disminución en la producción de huevos en un 10-50%, decoloración de la cáscara del huevo, deformación de la cáscara, deterioro del producto y cualidades de reproducción de los huevos. Cabe señalar que en los pollos adultos, el IB actualmente se presenta en forma borrada y los signos indicados, especialmente una disminución en la producción de huevos, son menos pronunciados. La deformación de la cubierta ("cinturón", etc.) también es un pequeño porcentaje. Los signos patológicos del síndrome respiratorio están representados por la presencia de exudado mucoso seroso en la cavidad nasal, tráquea, bronquios, acumulación de fibrina en el área de la bifurcación de la tráquea, edema pulmonar. Cuando se presenta el síndrome de nefrosis-nefritis: los riñones están agrandados, inflamados, flácidos, con un patrón abigarrado debido a la acumulación de uratos en los túbulos. Después de la nueva enfermedad, a menudo se detecta la atrofia de los lóbulos caudales de los riñones o la atrofia de la derecha, con menos frecuencia el riñón izquierdo. No hay daño a los pulmones. En aves adultas, se detecta una involución del ovario, atresia de los folículos maduros, peritonitis de la yema, disminución de la longitud y la masa del oviducto y atrofia de los lóbulos caudales de los riñones. En los embriones de pollo (CE), el virus del IB causa lesiones características, como el "enanismo" y la torsión. Algunos signos patológicos del IBC se presentan en las Figuras 1 a 7. Cuando se lleva a cabo la inmunoprofilaxis del IBC, debe recordarse que la inmunidad local es importante, que se puede garantizar mediante el uso de un método de vacuna en aerosol vivo, a partir de un día. Al establecer la circulación en la granja de cepas variantes del virus IBV, es necesario introducir la vacunación contra la cepa variante, sin abolir la vacunación con el uso de la vacuna que contiene la cepa de Massachusetts. El momento y la frecuencia de la vacunación deben determinarse sobre la base de la situación epizoótica en el hogar, así como teniendo en cuenta los resultados de los estudios de laboratorio. En gallinas ponedoras y hatos de aves de corral, la vacunación de 2 a 4 veces se lleva a cabo con una vacuna viva y luego se inactiva. Cuando se vacuna contra una cepa variante del virus IBV, es necesario alternar las vacunas que contienen la cepa Massachusetts y la variante variante. Además, la vacuna inactivada contra IB también debe contener dos cepas, es decir, Variedad de cepa y variante de Massachusetts. Solo en este caso, se puede proteger al ave de la variante del virus durante todo el período productivo. Antes de usar una vacuna viva que contenga una variante variante del virus IBV, es necesario realizar estudios para determinar la cepa circulante. Las siguientes cepas son las más comunes:

- 02 - ampliamente distribuido en Europa (Inglaterra, Alemania, Francia, España, Holanda),

D388 - Polonia, así como Bélgica, Holanda, Italia, Francia, Rusia, etc. Tiene un 99% de homología con QX,

QX - variedad china (Alemania, Rusia, etc.),

4/91 - en los últimos años se ha generalizado en Rusia.

Infección por metapneumovirus de las aves: qué es y cómo luchar

Infección por neumovirus de aves (rinotraqueitis infecciosa pavos o TRT, síndrome de hinchazón de la cabeza o Shs )

1. Introducción
A fines de la década de 1970, se notificó una nueva enfermedad respiratoria en Sudáfrica que ocurrió en pavos de 3 a 4 semanas. En las aves afectadas se observaron derrames nasales y oculares, así como inflamaciones menores de los senos infraorbitarios.

Esta patología difería de las enfermedades respiratorias previamente conocidas con un alto nivel de morbilidad y mortalidad. Los científicos Buys y Du Preez pudieron aislar el virus del exudado nasal de los pavos afectados y luego reproducir los síntomas de la enfermedad en el laboratorio, utilizando el aislado del virus para infectar.

En junio de 1985, la enfermedad se registró en el Reino Unido (Norfolk), desde donde se propagó rápidamente a otros países. La enfermedad recibió el nombre de rinotraqueítis de pavo (rinotraqueítis de pavo. TRT). Durante el estudio del agente etiológico aislado durante los brotes de la enfermedad, se encontró que la causa de la enfermedad es un virus que, por sus características, es similar a un virus aislado en Sudáfrica. En el curso de futuras investigaciones identificadas. que el virus pertenece a la familia de los paramixovirus (Paramyxoviridae). Para el género de los neumovirus (Pneumovirus).

A fines de la década de 1970, se reportó una enfermedad respiratoria desconocida en pollos en Sudáfrica, acompañada de síntomas respiratorios e hinchazón en el área de la cabeza. Los científicos Morley y Thomson lo llamaron Síndrome de hinchazón en la cabeza (síndrome de la cabeza inflamada, SHS) y sugirieron que fue causado por una infección mixta causada por un coronavirus (Coronavirus) y E. coli.

El síndrome de hinchazón de la cabeza también se ha informado en varios países europeos. La enfermedad ocurrió en hatos parentales, así como en capas y pollos de engorde. Varios agentes etiológicos se han incluido en la lista de posibles causas de este síndrome, pero ninguno de ellos ha sido probado al intentar reproducir experimentalmente la enfermedad.

Detección de anticuerpos contra el virus TRT en el suero, así como la liberación de partículas virales idénticas al virus TRT. del cuerpo de los pollos con signos de síndrome de hinchazón de la cabeza llevó a la creencia de que TRT es la causa de SHS. Más tarde, varios autores informaron sobre el aislamiento del virus TRT en aves de corral con síndrome de hinchazón de la cabeza (SHS).

Aunque se ha demostrado que el virus TRT está involucrado en la formación del síndrome de hinchazón de la cabeza (SHS, por sus siglas en inglés), en la actualidad todavía hay preguntas sobre la patogénesis de esta enfermedad que requieren resolución.

2. etiología
Clasificación
En la descripción inicial de esta enfermedad, los científicos Buys y Du Preez. declaró que el posible agente etiológico es Oriomyxovirus o Paramyxovirus. Данное заключение было сделано с учетом морфологии возбудителя, которая была установлена в лабораторных условиях на трахеальной культуре.

После регистрации заболевания в Европе Wyeth с соавторами подтвердил, что вирус принадлежит к семейству Paramyxovirus, роду Pneumovirus, поскольку он не вызывает гемагглютинацию эритроцитов кур, морских свинок, человека (1 группа крови).

В более поздних исследованиях по изучению структурных полипептидов при помощи электрофореза в полиакриламидном геле и РНК вируса, было показано, что вирус TRT имеет сходную структуру с другими вирусами из рода Pneumovirus.

El equipo de autores, dirigido por Yu, demostró que la roca de fondo de la superficie del virus TRT (polipéptido F y M) tiene una homología del 50% al estudiar la secuencia de sus aminoácidos en comparación con el virus de la infección respiratoria sincitial humana, lo que confirma una vez más que el virus TRT pertenece al género Pneumovirus. .

En la actualidad, se sabe que el género Pneumovirus representa cuatro virus: infección respiratoria sincitial humana, virus de infección respiratoria sincitial bovina, virus de neumonía de ratón y virus TRT. Dado que el virus TRT es el único miembro del género Pneumovirus que causa la enfermedad aviar, ha recibido otro nombre: el neumovirus aviar (Pneumovirus aviar, AGC).

Con respecto a la aparición del síndrome de hinchazón de la cabeza (SHS), prevalece la teoría de que el virus actúa como un agente primario. En el futuro, se introduce una infección bacteriana secundaria, que está representada en la gran mayoría de E. Coli y Pasteurella, que en condiciones favorables conduce a la aparición del síndrome anterior.

Morfologia
El virus TRT es muy pleomórfico, puede ser esférico o filamentoso. El diámetro de las partículas esféricas varía mucho y tiene un tamaño de 80 a 200 nm, y en ocasiones alcanza los 500 nm. Las formas filamentosas tienen un diámetro de 80 a 100 nm y una longitud de 1,000 nm. El virus tiene una cubierta representada por una capa lipídica con protuberancias en la superficie, cuya longitud es de 13-14 nm. Dentro de la cubierta hay una nucleocápside simétrica, en forma de espiral, cuyo diámetro es de 14 nm.
Estructura

Foto 1. Virus TRT. Microscopia electronica

El genoma del virus está representado por una única molécula de ARN no segmentada con una polaridad negativa. Durante la secuenciación, se estudiaron los genes que codifican las proteínas principales del virus (F, M, G, M, SH, P, N). Esta información le permite analizar sus diversos aislamientos, así como compararlos con otros miembros del género de neumovirus.

El virus tiene 9 polipéptidos, cuyo peso molecular varía de 14 Kda a 200 Kda.

Características fisicoquímicas
Las propiedades fisicoquímicas del virus TRT son típicas de todos los miembros de la familia Paramyxoviridae. Sin embargo, hay algunas características:
• El virus es sensible a los efectos de los disolventes lipídicos orgánicos (éter, cloroformo),
• El virus se inactiva a 56 ° C durante 30 minutos,
• El virus es estable a un pH de 3 a 9,
• La densidad de flotación en gradiente de sacarosa es 1.21 g / cm3,
• El virus no tiene actividad neuraminidasa.

El virus no causa hemaglutinación de los eritrocitos de pollos, gansos, cabras, cobayas y humanos (grupo sanguíneo 1).

Serotipado
A pesar de que todas las cepas del virus pertenecen al mismo serotipo, se aislaron dos subgrupos con anticuerpos monoclonales. La diferencia se establece sobre la base de la secuenciación del gen del polipéptido G. El subgrupo A combina las cepas inglesas, sudafricanas y algunas francesas, mientras que el subgrupo B incluye las cepas española, italiana y húngara.

Caracterización de cepas del virus TRT.
El estudio de las cepas de pavo y pollo demuestra la identidad de las características morfológicas, físico-químicas y estructurales. Ambas cepas inducen una respuesta inmune en ambas especies de aves.

Sin embargo, la cepa aislada de los pollos causa los signos clínicos de la enfermedad tanto en los pollos como en los pavos, y la cepa aislada de los pavos hace que la enfermedad se manifieste solo en los pavos.
Los estudios modernos que utilizan anticuerpos monoclonales indican que la estructura antigénica de los virus aislados de ambas especies de aves es la misma.

Caracterización de agentes bacterianos secundarios que complican la TRT.
Durante el registro de TRT, también se aisló una microflora bacteriana (Alcaligenes faecalis, Pasteurella multocida, Mycoplasma sp. E. coli, Staphylococcus) de un ave enferma. E. coli prevaleció entre las bacterias aisladas. En el curso de una investigación realizada por los científicos Morley y Thomson, O'Brien, Pages y Costa, se encontró que cuando se infecta con un cultivo de E. coli puro por escarificación en el área del cuero cabelludo, se presentan manifestaciones clínicas características del síndrome de inflamación de la cabeza. En el caso de la infección experimental simultánea con TRT y E. coli, la intensidad de la manifestación clínica aumenta en comparación con la infección separada con cada uno de los agentes anteriores. Las bacterias E. coli, Pasteurella haemolytica, Pasteurella multocida se aíslan más a menudo de adultos con síndrome de hinchazón de la cabeza, lo que indica su importancia como agentes secundarios en el caso de SHS.

Recientemente, Ornithobacterium rhinoatracheale (ORT) se ha agregado a la lista de agentes bacterianos secundarios que complican el curso de la TRT.

3. epizootología
Difundir
Como se mencionó anteriormente, los casos de TRT y las manifestaciones de SHS se informaron por primera vez en Sudáfrica y luego en Europa. Hoy en día, esta enfermedad se encuentra en todos los países donde se desarrolla la avicultura industrial, con la excepción de Australia. En los Estados Unidos, estas enfermedades han aparecido recientemente.
Morbilidad y mortalidad

TRT es una enfermedad contagiosa que conduce a una alta morbilidad y mortalidad. Dependiendo de la presencia de una infección bacteriana secundaria, su nivel en algunos casos puede alcanzar el 30%. Esta enfermedad puede ocurrir en granjas con el sistema de producción "todo está vacío, todo está ocupado", y en granjas que contienen aves de edad irregular.

La incidencia de SHS en manadas de pollos de engorde puede ser de 1 a 10%. La tasa de mortalidad depende de varios factores. Las capas pueden tener recurrencias de signos clínicos, pero cada caso subsiguiente es menos pronunciado que el anterior.

No se ha identificado la susceptibilidad genética de los cruces de aves individuales a esta enfermedad. Por otro lado, las condiciones de las aves, así como la presencia de una infección bacteriana secundaria afectan significativamente las tasas de incidencia y mortalidad.

Formas de transmisión
Se sabe que el contacto directo desempeña un papel importante en la transmisión de este virus. Los autores de Giraud, Cook, Williams describen la posibilidad de transmisión aérea. En cuanto a la transmisión vertical, no se sabe qué papel juega el virus TRT, que se localiza en el oviducto.

Susceptibilidad
Pavos, gallinas ponedoras y pollos de engorde están sujetos a infección por TRT.
Se han registrado casos de la enfermedad en gallinas de Guinea, faisanes y perdices. Las palomas no son susceptibles al virus.

4. Patogenia
El virus se multiplica en el tracto respiratorio superior: en la cavidad nasal, tráquea, en menor medida en los pulmones y las bolsas de las vías respiratorias. También se reportaron casos de replicación del virus en los órganos reproductivos de pavos de parvadas parentales. Después de 24 horas, se puede detectar en la cavidad nasal y la tráquea, donde se alcanza la cantidad máxima de virus en 3-5 días.

El virus se puede aislar de la cavidad nasal hasta 14 días después de la infección. Mediante la PCR, el genoma viral se detecta hasta 17 días después de la inoculación. El virus TRT tiene un tropismo para las células del epitelio velloso de la cavidad nasal y la tráquea, que conduce a la destrucción y pérdida de las vellosidades y contribuye a la penetración de la microflora secundaria.

A la luz de los últimos conocimientos sobre la patogenia de este virus, se realizaron estudios con métodos histológicos, inmunocitoquímicos y microscopía electrónica para determinar la presencia del virus en las condiciones de las granjas. Para esto, se seleccionaron 11 granjas de pollos de engorde, en las cuales se registró el síndrome de hinchazón de la cabeza. Las muestras semanales de la cavidad nasal y los sacos de aire se recogieron del ave.

Durante el estudio inmunocitoquímico se reveló la presencia del virus en el epitelio de las fosas nasales en aves a la edad de 2 semanas. La prueba de aves de corral a una edad mayor fue negativa. La microscopía electrónica ha confirmado estos resultados al detectar inclusiones de Tauro y daño a las vellosidades.

Foto 2. Hiperplasia y destrucción del epitelio de la cavidad nasal.

Estos resultados fueron complementados por estudios histológicos. En un ave a la edad de 3 a 4 semanas en un momento en que no se detectó el virus y las manifestaciones clínicas fueron las más graves, se encontraron inflamación catarral de la mucosa nasal y sinusitis de diferente gravedad.

Se sabe que el virus infecta al ave en las primeras semanas de vida y tiene un período corto de viremia, destruyendo las vellosidades y causando ciliostasis, que, a su vez, "abre las puertas de la infección" y promueve la colonización de la microflora bacteriana, que causa el síndrome de hinchazón de la cabeza. Los intentos fallidos de aislar el virus en el caso de un síndrome de hinchazón de la cabeza se explican por un período extremadamente corto de viremia en las primeras semanas de vida, ya que cuando aparecen los signos clínicos, el virus ya está ausente.

Foto 3. Reducción de la luz del bronquio por inflamación con infiltración linfocítica.

Se debe tener en cuenta el conocimiento de la patogenia del virus al desarrollar e implementar medidas preventivas y programas de vacunación.

5. Signos clínicos.
En esta enfermedad, los signos clínicos respiratorios suelen ser registrados. La enfermedad se acompaña de derrames nasales, estornudos, tos y también leve hinchazón en el área del espacio maxilar. Después de 2-3 días, el ave puede experimentar conjuntivitis purulenta e hinchazón en el área de la cabeza (SHS), lo que indica la presencia de complicaciones causadas por agentes bacterianos patógenos.

Las aves de corral de aves de corral pueden experimentar una disminución en la ingesta de alimento, la depresión ocurre dentro de las 24-48 horas, y aparece hinchazón en el área de la cabeza (síndrome de hinchazón de la cabeza, SHS). Después de 2-3 días, el pájaro comienza a inclinar o girar la cabeza. En un estudio de laboratorio se puede detectar osteoporosis séptica, cuya dinámica es irreversible.

Foto 4. Osteoporosis séptica.

Cabe señalar que en algunas granjas puede haber casos de detección de anticuerpos contra el virus TRT sin mostrar ningún signo clínico de la enfermedad.

En rebaños de gallinas ponedoras comerciales, a menudo hay casos de TRT cuando las medidas de prevención no se implementan lo suficiente. Su enfermedad se acompaña de síndrome de hinchazón de la cabeza, derrames nasales, ovariitis, así como decoloración de la cáscara en las aves "marrones" cruces.

Foto 5. Signos clínicos de SHS en aves parvadas parentales.

6. Cambios patológicos.
Entre los cambios macroscópicos visibles más comunes en los pavos se encuentran: rinitis serosa o purulenta y traqueítis. También puede haber sinusitis purulenta o caseosa, conjuntivitis, blefaritis.

En caso de complicaciones con la microflora secundaria, se pueden producir cambios como la aero-saculitis, la neumonía, la perihepatitis y la pericarditis. También se conocen casos de salpingitis en pavos parentales.

La infección experimental provoca la aparición de rinitis serosa, sinusitis única o bilateral en 2-3 días. En pavos de parvadas parentales, se puede observar rinitis serosa o purulenta, salpingitis, ovulación abdominal y ovariitis.

Foto 6. Capa comercial con signos de SHS.


Foto 7. Turquía afectada por el virus TRT.

Foto 8. Broiler con signos de SHS.

En pollos de engorde infectados, puede haber acumulaciones de masas caseosas en los tejidos subcutáneos de las porciones inferiores del espacio de la mandíbula y los aretes, rinitis menor, traqueítis y sinusitis. La aparición de complicaciones en forma de aerosaculitis, pericarditis, perihepatitis fibrinosa puede terminar en la muerte.

En caso de que se produzca un síndrome de inflamación de la cabeza en una gallina ponedora comercial o en un ave de la parvada parental, a menudo hay una acumulación de masas caseosas en el tejido subcutáneo. Se pueden producir rinitis, traqueítis, ovariitis, salpingitis y decoloración de las cáscaras de los huevos.

Cambios microscópicos
Durante el estudio de los cambios microscópicos en el citoplasma de las células epiteliales de la cavidad nasal y la tráquea, se detectan cuerpos de inclusión eosinófilos.

En el tejido subcutáneo de la cabeza, se revela una inflamación inflamatoria de granuloma, que puede penetrar profundamente en la dermis y la hipodermis. La inflamación tiene la forma de un granuloma con un foco necrótico, rodeado de colonias de bacilos gramnegativos y un área de inflamación de células epiteliales y células multinucleadas gigantes.

En los casos crónicos, se encuentra infiltración linfocítica inflamatoria.

El epitelio conjuntival suele estar en un estado de degeneración e hiperplasia. Hay hiperplasia del tejido linfoide de las glándulas lagrimales, pérdida de las vellosidades que recubren la superficie del tracto respiratorio, hiperemia congestiva y también acumulación de células linfoides (en forma de "nódulos") en la membrana submucosa del tracto respiratorio.

Los heterófilos y la fibrina se pueden encontrar en la superficie del pericardio, el hígado y los sacos de aire.

Foto 9. Tauro-inclusiones en las células del epitelio de la cavidad nasal. Microscopía electrónica.


Foto 10. Deformación vellosa. Microscopía electrónica.

7. Diagnóstico
El diagnóstico se realiza de forma integral.

Signos clinicos
Teniendo en cuenta únicamente los signos clínicos. El diagnóstico final es imposible. Se debe confirmar utilizando otros métodos de diagnóstico. Cabe señalar que el síndrome de hinchazón de la cabeza (SHS) puede ocurrir con una ligera presión del virus TRT y, por otro lado, puede ocurrir una infección intensiva con este virus con una leve manifestación de SHS.

Lanzamiento de virus
El medio más aceptable para el aislamiento del virus es el cultivo de órganos traqueales (CTO) de embriones de pollo o pavo.

Debe recordarse que el momento más óptimo para la liberación del virus es el comienzo de la aparición de los primeros signos clínicos respiratorios. Cuando los signos clínicos se hacen evidentes, existe el peligro de aislar otros patógenos secundarios que coexistan con el virus TRT.

Según los científicos Baxter-Jones y Jones ', Alexander y Majo descubrieron que el período de liberación máxima del virus se produce de 3 a 5 días después de la infección, cuando los signos clínicos son menos evidentes.

La excreción de virus debe ser de derrames nasales. Cavidades nasales, contenidos de senos infraorbitarios, tráquea.

Estudios serologicos
La reacción de inmunofluorescencia indirecta (RNIF). Para la investigación que utiliza este método, use tejido o moco de un ave o realice un estudio de cultivo de células TOK o Vero. infectado con el virus TRT. El método RNIF se puede usar para detectar anticuerpos contra el virus TRT.

Al comparar diferentes métodos serológicos, un grupo de autores dirigido por O'Loan descubrió que el método es más sensible cuando se lo clasifica en el cultivo de células Vero.

Reacción de neutralización (PH). Este método se utiliza para estudiar las propiedades del virus TRT. Se utilizan diferentes cultivos celulares en la reacción: CORRIENTE. Vero, BGM, MA 104. CEF.

Inmunoensayo (ELISA). El diagnóstico de TRT por este método es descrito por un grupo de investigadores liderado por Grant. Actualmente, se sabe que la especificidad del método depende del antígeno que se utiliza en el sistema de prueba.

El método de inmunocitoquímica está descrito por los científicos de O'Loan y Allan que utilizaron estreptavidina-biotina-inmunoperoxidasa (IP) y pudieron detectar el antígeno en las células del tracto respiratorio y los órganos reproductivos del ave afectada. Este método tiene varias ventajas y se utiliza para estudiar la patogenicidad del virus.

Diagnóstico Molecular (PCR)

Un grupo de científicos liderado por Jing desarrolló los diagnósticos usando la PCR al examinar muestras de la tráquea y el esófago de un ave infectada. Como resultado de la amplificación, se obtuvo un producto con un peso molecular de 541 pb.

Este método permite detectar un genoma viral específico hasta 17 días después de la infección.

Actualmente, el diagnóstico molecular de TRT es una herramienta extremadamente importante para estudiar la propagación de esta enfermedad.

8. Prevención
Dado que la TRT es una enfermedad viral, la terapia con antibióticos no puede ser efectiva. Sin embargo, el tratamiento de las aves de corral con antibióticos se vuelve relevante si la microflora secundaria está involucrada en el proceso patológico.
La vacunación

Hasta hace poco, solo se utilizaban vacunas inactivadas para controlar la situación de esta enfermedad, cuya efectividad se determinó mediante los métodos serológicos descritos anteriormente. La vacunación con Cxexta, que se recomendó para parvadas parentales, incluyó la vacunación con X10H0 doble o vacunas polivalentes inactivadas entre las edades de 12 y 18-19 semanas. Para pollos de engorde, la vacuna se usó solo con fines experimentales. La vacunación de pavos sugirió el uso de una vacuna combinada contra TRT y la enfermedad de Newcastle.

Actualmente, el esquema de vacunación para parvadas parentales y portadores comerciales incluye la vacunación con vacuna viva seguida de la revacunación con una vacuna inactivada. Para pollos de engorde y pavos en granjas disfuncionales use vacunas vivas.

El nivel de protección humoral después de la administración de la vacuna viva es bajo. Sin embargo, se ha probado experimentalmente que, incluso con un bajo nivel de anticuerpos humorales posteriores a la vacunación, el ave es inmune a la enfermedad.

A pesar de la diversidad antigénica existente de este virus, según Cook, las vacunas modernas brindan una protección efectiva.

No se recomienda usar vacunas vivas en combinación con otras vacunas (IB. ND), ya que pueden inhibir la replicación del virus de la vacuna e impedir la formación de la respuesta inmune.

¿Qué es el metapneumovirus en aves?

El metaneumovirus aviar (MISP) es el agente causante de la rinotraqueitis infecciosa en las aves, así como la causa del síndrome de cabeza inflamada (SHS). Впервые он был зафиксирован ещё в 1970 году в ЮАР, но по сей день в некоторых странах его не зарегистрировали официально. Изначально считали, что это заболевание имеет бактериальную природу, однако позднее при помощи исследования эмбрионов птиц и фрагментов тканей из трахеи, выделили этиологический агент TRT, идентифицировав его как вирус. Inicialmente, se clasificó como una clase de neumovirus, pero después del descubrimiento de formas virales similares, se reentrenó en un metapneumovirus.

¿Cómo se produce la infección?

La infección con este virus se produce horizontalmente (de un individuo a otro a través del aire o las secreciones). El principal modo de transmisión es el contacto directo de las aves infectadas y sanas (a través de los estornudos, la infección se contagia en la comida, las plumas de otras aves). El agua y el alimento también pueden actuar como portadores temporales (la tensión en el entorno externo se vuelve inestable, por lo tanto, no vive fuera del cuerpo durante mucho tiempo).

Existe la posibilidad de su transmisión vertical (de la madre a los descendientes). El virus metaneumovirus se encontró en pollos recién nacidos, lo que indica la posibilidad de infección de huevos. Incluso las personas pueden contribuir a una mayor transmisión del virus moviéndolo en sus zapatos y ropa.

Lo que ataca un pájaro de granja

Inicialmente, el virus fue visto en pavos. Pero hoy en día, la lista de posibles especies de aves que son susceptibles a esta enfermedad ha aumentado significativamente e incluye:

Una vez en el cuerpo, el virus comienza a proliferar activamente en las células epiteliales del tracto respiratorio, haciendo que su actividad pierda los cilios por el epitelio. A su vez, la membrana mucosa, desprovista de estos cilios, no es capaz de soportar infecciones secundarias que, al penetrar en el cuerpo, reducen la lucha ya inefectiva del cuerpo contra el metaneumovirus.

Síntomas clinicos

Los signos clásicos de un metaneumovirus son estornudos, tos, secreción mucosa nasal e hinchazón de la cabeza y conjuntivitis. Dado que este virus está acompañado de enfermedades respiratorias, los síntomas serán muy similares a ellos. Con el tiempo, el efecto del virus en el cuerpo del ave se extiende a los sistemas reproductivo y nervioso.

El ave deja de correr, o la calidad de sus huevos disminuye significativamente, la cáscara se deteriora. El efecto del virus en el sistema nervioso se puede notar al llamar la atención sobre síntomas como la tortícolis y el opistótono (postura convulsiva con la espalda arqueada y la cabeza inclinada hacia atrás).

Uso combinado de ELISA y PCR

Para el análisis simultáneo por dos métodos, a los primeros signos de la enfermedad, se toman muestras del material (frotis) de los senos y la tráquea para el análisis de PCR. En el caso de síntomas severos de la enfermedad, no se recomienda el muestreo. Es necesario elegir individuos con una manifestación moderada de síntomas. Para el análisis ELISA, la sangre se extrae de individuos en el mismo hato. Esto hace posible saber si el ave ha tenido contacto previamente con este virus.

Interpretación de resultados de laboratorio.

Para la formulación del diagnóstico correcto se requieren datos de diagnóstico serológico y molecular. El primer estudio tiene como objetivo identificar los anticuerpos producidos por el cuerpo para combatir el virus. El segundo tipo de diagnóstico está diseñado para identificar el agente causante de la enfermedad en varias muestras biológicas.

Método de control y vacunación.

Se recomienda el uso de vacunas vivas contra este virus. Los inactivados no se aplican debido a que muestran una baja eficiencia en animales jóvenes, causan un aumento en el nivel de estrés del ave, lo que, a su vez, afecta su productividad y desarrollo. La ventaja de las vacunas vivas es que forman inmunidad local en el tracto respiratorio superior.

Asegurando la protección adecuada

Para proteger al rebaño de aves de esta infección, se debe llevar a cabo una vacunación oportuna, y se deben mantener los siguientes estándares: densidad de siembra, limpieza de las instalaciones y control de calidad de los piensos. Vale la pena recordar que el metapneumovirus se elimina de manera efectiva en las primeras etapas del diagnóstico, por lo tanto, en las primeras sospechas, es necesario realizar todos los estudios necesarios para realizar un diagnóstico y tomar medidas para eliminar el virus de manera efectiva.

Método de control del metaneumovirus en pollos de engorde.

El principal problema asociado con la MPO en pollos de engorde son los síntomas respiratorios. Para combatir esta infección en pollos de engorde, la vacunación con vacunas vivas es efectiva.

El uso de vacunas MPO inactivadas no se recomienda por varias razones:

  • contiene un riesgo por la calidad de la carcasa en el fondo del pozo debido a los residuos no absorbidos de la vacuna,
  • el proceso de vacunación con vacunas inactivadas y la vacunación de pollos jóvenes con vacunas oleosas causa estrés, lo que afecta el crecimiento de las aves y la uniformidad del lote,
  • Las inmunoglobulinas de clase Ys (IgY) se generan solo mediante vacunas inactivadas o anticuerpos maternos. Ellos mostraron una baja eficacia en la prevención de la infección del tracto respiratorio en pollos y pollos de un día después de la infección con cepas de MPO virulentas.
  • Metapneumovirus en aves puede infectar aves con títulos altos de anticuerpos maternos,
  • Aunque los anticuerpos maternos pueden limitar la replicación y la excreción viral, no evitan el daño al tracto respiratorio superior. Esto se explica por el hecho de que los anticuerpos maternos funcionan durante el período de viremia, que se observa ya después del desarrollo de cambios patológicos en las vías respiratorias del ave.

La efectividad de las vacunas vivas consiste principalmente en la formación de inmunidad local en el tracto respiratorio superior, que se genera en los tejidos diana. Esta inmunidad se basa en el trabajo de la inmunidad mediada por células y la producción de inmunoglobulinas secretoras de clase A (sIgA) en la mucosa.

Teniendo en cuenta que la formación de inmunidad local en los tejidos diana es la más importante, el método de elección para la vacunación es la introducción directa de la vacuna en la diana para la replicación del virus en el tejido.

En este caso, para la formación de inmunidad local en el tracto respiratorio superior, los mejores métodos de vacunación con una vacuna viva contra el metaneumovirus son la vacunación intraocular, o un spray de aerosol grande.

Con esto concluye la historia sobre la enfermedad Metapneumovirus en aves y los métodos de diagnóstico, la vacunación con vacunas vivas.

¡Buena suerte a todos y salud a tus plumas!


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